目前，腫瘤轉(zhuǎn)移仍是阻礙結(jié)直腸癌(CRC)治療的難點。為此，研究能夠抑制腫瘤轉(zhuǎn)移且高效無毒的天然藥物，已成為近年來結(jié)直腸癌研究的重點。
早前的研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤微環(huán)境(TME)在CRC肺轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用，其免疫抑制狀態(tài)是CRC發(fā)生肺轉(zhuǎn)移的重要原因。TME中的成纖維細胞（NFs）受到轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）等細胞因子等刺激后被激活轉(zhuǎn)化為癌相關(guān)成纖維細胞（CAFs），是CRC腫瘤微環(huán)境中免疫調(diào)節(jié)的主要參與者之一，其可以產(chǎn)生大量的細胞外基質(zhì)、趨化因子、細胞因子等，影響免疫細胞的募集和功能分化，導致TME免疫抑制狀態(tài)，促進腫瘤免疫逃逸，導致腫瘤轉(zhuǎn)移。
因此CAFs作為TME的核心組成部分，已成為抗癌治療領域的研究熱點。
而中藥活性成分靈芝多糖（GLP）作為一種具有多種生理活性的天然藥物，其輔助治療腫瘤已有較長的應用歷史，已有研究發(fā)現(xiàn)其可通過調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中 CD4+/CD8+細胞、Treg 細胞、T 淋巴細胞的免疫功能抑制腫瘤進展和轉(zhuǎn)移。但目前尚無其對腫瘤微環(huán)境中CAFs細胞作用的相關(guān)報道。
為此，四川省中醫(yī)藥科學院菌類藥材研究的科研人員進行了深入的實驗研究，以期在這一重要領域取得突破性的進展。
靈芝多糖
對癌相關(guān)成纖維細胞影響研究進展
本研究以腸癌CAFs細胞模型和腸癌肺轉(zhuǎn)移小鼠模型，并綜合運用MTT法、流式細胞術(shù)和RT-PCR等多種實驗方法，深入探究了GLP對CAFs的影響。
研究結(jié)果顯示，GLP能有效抑制CAFs的增殖，誘導其凋亡，并降低其活性。進一步的分析表明，GLP可能通過減弱CAFs的活性來抑制腸癌的轉(zhuǎn)移。
1、對CAFs增殖的影響
MTT實驗結(jié)果顯示：GLP對正常成纖維細胞增殖無明顯抑制作用；但在25~400μg·mL-1濃度范圍內(nèi)，GLP對腸癌CT26細胞具有抑制效應；在12.5~400μg·mL-1范圍內(nèi)，GLP對CAFs 細胞具有抑制效應。
數(shù)據(jù)表明，靈芝多糖能特異性抑制腸癌成纖維細胞增殖，對正常成纖維細胞增殖無抑制作用。
2、對CAFs凋亡的影響
Annexin V-FITC/PI雙染凋亡檢測結(jié)果表明，經(jīng)不同濃度的GLP處理后，CAFs的早期凋亡比例和總體凋亡比例均有上升趨勢，尤其在200μg·mL-1濃度時，GLP提升CAFs的早期凋亡比例和總體凋亡比例效果最為顯著。
數(shù)據(jù)提示，靈芝多糖能有效誘導腸癌成纖維細胞發(fā)生細胞凋亡。
3、對CAFs活化基因mRNA表達影響
實驗發(fā)現(xiàn)，不同濃度的GLP作用于腸癌CAFs，均能促進NFs向CAFs的轉(zhuǎn)化的α-SMA、FAP等活化基因mRNA表達水平受到不同程度的降低，其中以100 μg·mL-1和200 μg·mL-1對α-SMA基因mRNA的效果更為明顯；而在200 μg·mL-1濃度時，則對FAP基因mRNA表達水平抑制效果更為顯著。
數(shù)據(jù)表明，靈芝多糖能通過α-SMA、FAP等活化基因mRNA表達水平來調(diào)節(jié)抑制腸癌成纖維細胞的活化，從而抑制CRC轉(zhuǎn)移。
4、對CAFs功能相關(guān)基因mRNA表達影響
CAFs可以從正常的常駐組織成纖維細胞中招募和激活，這種激活在很大程度上依賴于TME刺激，如鄰近腫瘤細胞和浸潤性免疫細胞釋放的生長因子TGF-β1等成纖維細胞募集和激活的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
而CAFs又在構(gòu)建腫瘤微環(huán)境中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，可產(chǎn)生多種細胞外基質(zhì)蛋白和調(diào)節(jié)分子，如轉(zhuǎn)化生長因子 TGF-β1、成纖維細胞生長因子受體 FGFR1、程序性死亡受體-1 配體（PDL1）等，從而參與腫瘤免疫負調(diào)節(jié)，促進腫瘤轉(zhuǎn)移。
而本研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的GLP作用于腸癌CAFs后，其PD-L1、FGFR1、Smad2、TGF-β1基因mRNA表達水平均呈下調(diào)趨勢。
數(shù)據(jù)表明，靈芝多糖降低腸癌成纖維細胞活性的機制可能與下調(diào) PD-L1、FGFR1、Smad2、TGF-β1 基因的表達有關(guān)。
5、對CAFs介導的腫瘤轉(zhuǎn)移影響
研究人員還通過小鼠動物實驗進一步觀察到，小劑量、中劑量的GLP注射，均能使小鼠肺組織中腸癌轉(zhuǎn)移灶數(shù)量呈減少趨勢，而大劑量GLP注射則能顯著性減少轉(zhuǎn)移灶數(shù)量。
數(shù)據(jù)表明，靈芝多糖小、中、大劑量組均能降低癌細胞轉(zhuǎn)移發(fā)生率，抑制腸癌細胞轉(zhuǎn)移。
參考文獻：
[1]李芳,羅舒,余夢瑤,等.靈芝多糖通過減弱癌相關(guān)成纖維細胞活性抑制腸癌轉(zhuǎn)移的作用研究[J/OL].沈陽藥科大學學報,1-16[2024-06-14].https://doi.org/10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2023.0953.
注：本文旨在介紹科學研究進展，不做治療方案推薦。